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目的: 探讨体外诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化和凋亡间的关系,为进一步延长神经元样细胞的存活提供理论和实验依据.方法: 采用全骨髓法分离培养成年SD鼠骨髓基质干细胞至第5代,以β-巯基乙醇(1 mmol/L)及维甲酸(RA,10-6mol/L)诱导分化,于诱导后1 h、3 h、5 h分别行神经元特异性抗原MAP-2免疫组化鉴定,并计数神经元样细胞数,计算分化率.核荧光染料DAPI检测诱导后5 h和24 h细胞核的凋亡特异性形态学改变,流式细胞仪对细胞凋亡峰的分析检测诱导后1 h、3 h、5 h细胞凋亡率.结果:成年鼠骨髓基质干细胞经β-巯基乙醇(1 mmol/L)及维甲酸(RA,10-6 mol/L)诱导30 min后可见神经元样细胞出现,经MAP-2免疫组化鉴定,此类细胞呈阳性,诱导后1 h、3 h、5 h神经元样细胞分化率分别为41

作者:张蒙夏;谢富康

来源:中国病理生理杂志 2003 年 19卷 1期

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作者:
张蒙夏;谢富康
来源:
中国病理生理杂志 2003 年 19卷 1期
标签:
干细胞 细胞凋亡 细胞分化 免疫组织化学 流式细胞术
目的: 探讨体外诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化和凋亡间的关系,为进一步延长神经元样细胞的存活提供理论和实验依据.方法: 采用全骨髓法分离培养成年SD鼠骨髓基质干细胞至第5代,以β-巯基乙醇(1 mmol/L)及维甲酸(RA,10-6mol/L)诱导分化,于诱导后1 h、3 h、5 h分别行神经元特异性抗原MAP-2免疫组化鉴定,并计数神经元样细胞数,计算分化率.核荧光染料DAPI检测诱导后5 h和24 h细胞核的凋亡特异性形态学改变,流式细胞仪对细胞凋亡峰的分析检测诱导后1 h、3 h、5 h细胞凋亡率.结果:成年鼠骨髓基质干细胞经β-巯基乙醇(1 mmol/L)及维甲酸(RA,10-6 mol/L)诱导30 min后可见神经元样细胞出现,经MAP-2免疫组化鉴定,此类细胞呈阳性,诱导后1 h、3 h、5 h神经元样细胞分化率分别为41