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目的:构建不稳定型心绞痛淋巴细胞差异表达cDNA消减文库.方法:将不稳定型心绞痛病人(n=15)和稳定型心绞痛病人(n=15)的淋巴细胞的RNA进行抑制性消减杂交(SSH),将获得的顺向和逆向消减产物分别与T/A载体连接,采用1×TSS一步法转化大肠杆菌JM109,获得消减cDNA文库,采用蓝白斑筛选和菌落PCR筛选有插入片段的克隆.结果:各组cDNA文库各获得2000个阳性克隆, cDNA片段大部分分布于(200-600) bp之间.结论:本研究构建了不稳定型心绞痛淋巴细胞消减cDNA文库,此 cDNA文库有助于进一步筛选不稳定型心绞痛淋巴细胞中的差异表达基因.

作者:张斌;梁雪清;余细勇;冯建章

来源:中国病理生理杂志 2003 年 19卷 9期

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作者:
张斌;梁雪清;余细勇;冯建章
来源:
中国病理生理杂志 2003 年 19卷 9期
标签:
心绞痛,不稳定型 抑制性消减杂交 消减cDNA文库
目的:构建不稳定型心绞痛淋巴细胞差异表达cDNA消减文库.方法:将不稳定型心绞痛病人(n=15)和稳定型心绞痛病人(n=15)的淋巴细胞的RNA进行抑制性消减杂交(SSH),将获得的顺向和逆向消减产物分别与T/A载体连接,采用1×TSS一步法转化大肠杆菌JM109,获得消减cDNA文库,采用蓝白斑筛选和菌落PCR筛选有插入片段的克隆.结果:各组cDNA文库各获得2000个阳性克隆, cDNA片段大部分分布于(200-600) bp之间.结论:本研究构建了不稳定型心绞痛淋巴细胞消减cDNA文库,此 cDNA文库有助于进一步筛选不稳定型心绞痛淋巴细胞中的差异表达基因.