目的:以酪氨酸酶基因作为报告基因转染HEK293细胞,利用其合成大量黑色素而能被MRI 检测的特性来反映基因表达的情况,以探索磁共振成像(MRI)评价体外细胞基因表达的方法.方法: 以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HEK293细胞,以MRI T1WI、T1WI/SPIR、T2WI序列扫描转染细胞,观察表达的黑色素的MRI信号.应用Fontana染色检测黑色素的合成,RT-PCR检测酪氨酸酶基因的cDNA片段,以进一步验证酪氨酸酶基因的转染与表达.结果:(1)pcDNA3tyr质粒转染进入HEK 293细胞并在其中表达生成黑色素,转染5 μg、10 μg、20 μg质粒的106个细胞内生成的黑色素能够被MRI检测到并在MRI T1WI、T1WI/SPIR、T2WI检查呈高信号,MRI信号强度与转染质粒量成正相关.(2) Fontana染色法检测到HEK293细胞内的黑色素颗粒;(3)采用RT-PCR方法检测到转染的HEK293细胞含酪氨酸酶基因的cDNA片段.结论: MRI能够检测到HEK293细胞内由外源基因表达合成的黑色素,说明影像学与分子生物学技术结合可以评价体外细胞基因表达的情况.
作者：元建鹏；梁碧玲；谢榜昆；钟镜联；李勇；张卫东
来源：中国病理生理杂志 2003 年 19卷 9期
