目的:确定阻抑结肠癌LS-174T细胞中过量表达的真核细胞起始因子-4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)是否促进乙酰肝素酶(heparanase)mRNA的降解,并改变其翻译表达水平.方法:应用脂质体包裹与eIF-4E mRNA翻泽起始点互补的asODN,转染处理人大肠腺癌细胞LS-174T.使用Western blot和RT-PCR方法分别检测eIF-4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变.乙酰肝素酶mRNA在细胞内水平采用Northern blot定量检测,其蛋白表达水平改变采用Western blot检测.结果:asODN经脂质体转染LS-174T细胞后,eIF-4E基因表达明显受到抑制,其蛋白表达产物也显著下降.伴随eIF-4E被阻抑表达,Northern blot结果显示乙酰肝素酶mRNA水平下降,且其蛋白翻译表达量也降低.结论:阻抑eIF-4E影响LS-174T细胞乙酰肝素酶mRNA稳定、促使其降解,并降低乙酰肝素酶表达.
作者：杨玉捷；钟世顺；简燕婷；万田漠；傅思武；李旭；张亚历
来源：中国病理生理杂志 2004 年 20卷 10期
