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目的:研究人胶原沉积抑制因子(decorin)在大肠杆菌DH5α中的表达特性.方法:用SDS-PAGE法检测pGEX-4T-1-decorin融合克隆在大肠杆菌DH5α中表达,选择阳性表达克隆;测定1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)最佳诱导时间;用超声波裂解法分析GST-decorin融合蛋白的可溶性.用Western blotting进行定性分析.结果:用1mmol/L IPTG诱导时,融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中表达;最佳诱导时间为4h;大部分融合蛋白以包涵体的形式存在;所表达蛋白为GST融合蛋白.结论:GST-decorin融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中大量表达,但以包涵体的形式存在.

作者:杨国嵘;朱任之;何晓霞;薛永杰;贺雪姣;郁荣

来源:中国病理生理杂志 2007 年 23卷 6期

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作者:
杨国嵘;朱任之;何晓霞;薛永杰;贺雪姣;郁荣
来源:
中国病理生理杂志 2007 年 23卷 6期
标签:
Decorin 融合蛋白质类 原核表达
目的:研究人胶原沉积抑制因子(decorin)在大肠杆菌DH5α中的表达特性.方法:用SDS-PAGE法检测pGEX-4T-1-decorin融合克隆在大肠杆菌DH5α中表达,选择阳性表达克隆;测定1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)最佳诱导时间;用超声波裂解法分析GST-decorin融合蛋白的可溶性.用Western blotting进行定性分析.结果:用1mmol/L IPTG诱导时,融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中表达;最佳诱导时间为4h;大部分融合蛋白以包涵体的形式存在;所表达蛋白为GST融合蛋白.结论:GST-decorin融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中大量表达,但以包涵体的形式存在.