目的:将具有缺氧调控作用的多种缺氧反应元件(HRE)与CMV启动子组合,以获得缺氧应答启动子.将荧光素酶报告基因置于缺氧应答启动子的下游,通过检测荧光素酶活性的方法,方便地研究缺氧应答启动子缺氧诱导的作用.方法:合成多种HRE核苷酸序列,并设立HRE突变对照,克隆入pCI-neo中,构建HRE/CMV启动子.扩增HRE/CMV序列,定向亚克隆入pGL3-Basic中,获得HRE/CMV荧光素酶报告载体.瞬时转染HeLa细胞,在0.1
作者:杨洁;杜德伟;李占亭;贾林涛;赵晶;许彦鸣;杨安钢;孙脊峰
来源:中国病理生理杂志 2007 年 23卷 12期