目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)影响内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的可能机制.方法:采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,培养4 d后,收集贴壁细胞,加入不同浓度Hcy(10 μmoL/L、30 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L)干预,或先予以 1μmol/L阿托伐他汀预处理1h,然后再用200 μmol/L Hcy干预.采用SA-B-半乳糖苷酶染色试剂盒检测衰老细胞,细胞增殖ELISA试剂盒和集落生成能力测定实验检测EPCs的增殖能力和集落形成能力,端粒重复序列扩增法(TRAP)-ELISA定量检测端粒酶活性,Western blotting检测EPCs Akt Ser473磷酸化水平.结果:Hey呈浓度依赖性增加SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数量,200 μmol/L最为显著,较对照增加了2倍(15.2±9.8vs51.9±13.5,P<0.01),而阿托伐他汀能显著减少Hey诱导的衰老细胞的数量.此外,Hey干预后伴随EPCs增殖和集落形成能力的显著损害.Hcy随着浓度的增加而显著降低EPCs端粒酶活性.进一步研究发现Hey显著减少Akt磷酸化.结论:Hey加速EPCs衰老,伴随EPCs增殖和集落形成能力的损害,提示细胞衰老也许是Hey损害EPCs的机制之一.Hey加速EPCs衰老可能跟EPCs端粒酶活性下降以及Akt磷酸化水平的下降有关.阿托伐他汀可以预防Hcy对EPCs的损害效应.
作者：朱军慧；马彩艳；陈君柱；王兴祥；张芙荣；傅国胜
来源：中国病理生理杂志 2009 年 25卷 1期
