目的:观察3T3-L1脂肪细胞分化过程中G蛋白亚单位、磷脂酰肌醇3激酶(P13K)亚单位和蛋白激酶C(PKC)亚型蛋白表达的时序性变化规律,探讨GB/Gaq-PDK-PKC信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用.方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,采用经典激素鸡尾酒诱导法(分化诱导剂1-甲基3-异丁基黄嘌呤+地塞米松+胰岛素)诱导分化,并以加入诱导分化液的时间为起点,于0 d、6 h、12 h、1 d、3 d、6 d、9 d收集细胞后立即进行蛋白抽提,用Western blotting分别检测细胞中G13、Gaq/11、P13K-IA类和IB类部分亚单位磷酸化水平、磷酸化PKCct和S的表达变化.结果:诱导分化进程中:6 h时,各检测信号物质表达均不同程度升高;12 h时,磷酸化P13K-P85、p110γ表达达高峰(P<0.05),Gβ明显升高(P<0.05),p101轻度升高,磷酸化PKC水平有所下降;1 d时,Cβ表达达高峰(P<0.01),P13K-p85总水平及磷酸化P13K-p85、p55、p110γ、p101开始不同程度下降,Gaq/11和磷酸化PKCα继续升高(P<0.01);3d时,Gα/11和磷酸化PKCa表达达高峰(P<0.01);6d时,Gαq/11和磷酸化PKCct表达仍维持在较高水平,PKCs明显降低(P<0.01);成熟脂肪细胞内(分化9 d)磷酸化p55、p85和PKCS水平分别是前脂肪细胞的33.55
作者：吴静；胡秀芬；王宏伟；林汉华；梁晓燕；温宇
来源：中国病理生理杂志 2009 年 25卷 1期
