目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对Con A诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制.方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖情况;利用流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测CD3~+T细胞早、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况;用Fluo-4/AM荧光钙离子探针技术检测细胞内钙离子([Ca~(2+)]_i)浓度的变化;以碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布;运用流式细胞术(FCM)结合三色荧光染色技术检测CD4~+CD25~(high)Treg早期活化抗原CD69表达情况.结果:CFDA-SE染色结果显示,DHA能有效抑制Con A诱导的T细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性;DHA对Con A刺激的CD3~+T细胞CD69、CD25的表达有促进作用,而对CD71的表达有抑制作用,均呈剂量依赖性;DHA单独作用不能引起T细胞[Ca~(2+)]_i的升高,在Con A的刺激下能引起[Ca~(2+)]_i浓度升高;PI染色流式分析结果显示,DHA阻滞细胞于G_0/G_1期,阻止细胞进入S期和G_2/M期;DHA能够下调CD4~+CD25~(high)Treg细胞CD69的表达.结论:DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂.
作者：叶燕霞；曾耀英；黄秀艳；陆晓宇；曾祥凤；王希朝
来源：中国病理生理杂志 2010 年 26卷 3期
