目的:研究线粒体融合蛋白基因2(mfn2)对非酒精性脂肪肝细胞线粒功能的影响.方法:利用脂质体lipofectamine2000将mfn2基因荧光表达载体 (pEGFP-mfn2)转染肝细胞株L02,并采用油酸诱导L02建立非酒精性脂肪性肝细胞模型,RT-PCR及Western blotting检测细胞mfn2 mRNA和蛋白的表达;荧光素酶ADP/ATP发光法检测各组细胞内ATP水平,荧光探针DCFH-DA测定细胞活性氧(ROS)生成水平;JC-1 标记细胞线粒体,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位(Δψm)的变化.结果:转染mfn2基因的L02可以稳定高表达mfn2 mRNA及蛋白,转染后L02内ATP浓度及线粒体跨膜电位显著升高(P<0.05),而ROS生成水平则显著下降(P<0.05);经油酸诱导肝细胞脂肪变性后,L02mfn2 表达受抑制,各组细胞内ATP浓度及线粒体跨膜电位均显著下降(P<0.01),而ROS生成水平较前均显著升高(P<0.01),但转染组细胞内ATP下降水平以及线粒体跨膜电位下降幅度均显著低于未转染组,而未转染组ROS升高程度则显著高于转染组(P<0.01).结论:外源性mfn2基因转染可以抑制油酸诱导的肝细胞内ATP浓度和线粒体跨膜电位的下降以及ROS生成的增加.
作者:张勇;胡文君;王尧;夏耘;郑启昌
来源:中国病理生理杂志 2010 年 26卷 3期