目的:运用RNA干扰(RNAi)技术沉默人肺泡II型上皮细胞株A549的B细胞淋巴瘤-2相关基因(Bax),探讨Bax在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导A549细胞凋亡中的作用.方法:体外培养A549细胞,利用脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的Bax小干扰RNA(siRNA)转染入A549细胞,给予10 μg/L TNF-α刺激24 h,RT-PCR检测bax mRNA的表达,Western blotting和免疫组化检测Bax蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.结果:化学合成的Bax siRNA抑制了A549细胞Bax mRNA和蛋白的表达(P<0.05),流式细胞术显示Bax siRNA组的细胞凋亡率明显低于TNF-α组和阴性对照siRNA组(P<0.05).结论:体外实验证明Bax的高表达在TNF-α诱导A549细胞凋亡中发挥了重要的促凋亡作用,利用RNAi技术沉默Bax基因可以有效抑制由TNF-α介导的A549细胞凋亡.
作者:胡根;李理;黄文杰
来源:中国病理生理杂志 2010 年 26卷 4期