目的:探讨腺病毒介导人生长终止特异性同源异型盒基因(hGax基因)转染对血清刺激后兔血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移和细胞周期的影响,为静脉桥再狭窄基因治疗新策略提供帮助.方法:构建含hGax的重组腺病毒载体并感染兔VSMCs;应用RT-PCR、免疫荧光染色检测hGax mRNA和蛋白的表达;MTT法观察hGax基因过表达对血清刺激后VSMCs增殖的影响;划痕法测定细胞迁移;流式分析细胞周期.结果:成功构建Ad5-hGax重组腺病毒载体.转染48 h后 RT-PCR和免疫荧光染色法示转染hGax基因的VSMCs中存在目的基因特异性片段(174 bp)和目的蛋白表达;MTT法示hGax蛋白显著抑制血清刺激后VSMCs增殖;划痕法示hGax基因过表达明显抑制血清刺激后VSMCs迁移;流式结果示血清刺激72 h后,Ad5-hGax转染组G0/G1期细胞比例明显增加,G2/M+S期细胞减少.结论:含hGax的重组腺病毒载体构建成功,并在细胞中过表达.hGax基因过表达能有效抑制血清刺激后兔VSMCs的增殖和迁移,并使细胞停滞于G0/G1期.
作者：郑辉；薛松；连锋；胡振雷；汪永义
来源：中国病理生理杂志 2012 年 28卷 2期
