目的:探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/ CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)轴调控间充质干细胞定向分化、修复缺氧缺血性脑损伤的作用.方法:大鼠间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)经缺氧培养不同时点(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)或SDF-1α(10 μg/L)孵育后,采用RT-PCR、Western blotting和流式细胞术检测其表面CXCR4表达的变化;建立大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,运用RT-PCR和Western blotting检测造模后不同时点(1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d)大鼠脑部海马组织中SDF-1α mRNA转录和蛋白表达的改变情况;用AMD3100(CXCR4拮抗剂)拮抗rMSCs 表面CXCR4后,免疫细胞化学和Western blotting检测rMSCs诱导向神经细胞分化中神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)等神经细胞特异性标志物的阳性率及表达变化情况.结果:低氧培养6 h及12 h的 rMSCs CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均较常氧培养组明显增加(P<0.01),10 μg/L SDF-1α孵育后rMSCs 的CXCR4表达水平明显增加(P<0.01);缺氧缺血性脑损伤模型的大鼠脑内SDF-1α蛋白表达显著增加(P<0.01); 5 mg/L AMD3100处理后的rMSCs在向
作者:余勤;林洁;刘丽珍;王艳;宣晓波;王标;单威;周丽萍;刘伟
来源:中国病理生理杂志 2012 年 28卷 8期