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目的:转录因子干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响.方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(WT)或IRF8全基因敲除(IRF8-/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4+T细胞(CD4+ CD62L+ CD441ow),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例.(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选WT或IRF8-/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4+ CD25+ Treg,WT小鼠的CD4+ CD45RBhi T细胞单独或者分别联合WT或IRF8--小鼠的CD4+ CD25+Treg腹腔注射给RAG1-/-小鼠;WT或IRE8-/-小鼠的naive CD4+ CD45RBhiT细胞腹腔注射给RAG1-/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测.结果:(1) IRF8-/-较WT的naive CD4+T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<0.01),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05).(2)CD4+ CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠,IRF8-/-较WT供体鼠引起的RAG1-/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高(P<0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17+ CD4+细胞比例明显增高(P<0.01),

作者:李庆山;杜庆华;谢健晋;邓家德;余碧珍;江雪杰;孟凡义

来源:中国病理生理杂志 2014 年 30卷 1期

知识库介绍

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作者:
李庆山;杜庆华;谢健晋;邓家德;余碧珍;江雪杰;孟凡义
来源:
中国病理生理杂志 2014 年 30卷 1期
标签:
实验性肠炎,免疫介导 Th17细胞 干扰素调节因子8 Experimental colitis,immune-mediated Th17 cells Interferon regulatory factor 8
目的:转录因子干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响.方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(WT)或IRF8全基因敲除(IRF8-/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4+T细胞(CD4+ CD62L+ CD441ow),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例.(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选WT或IRF8-/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4+ CD25+ Treg,WT小鼠的CD4+ CD45RBhi T细胞单独或者分别联合WT或IRF8--小鼠的CD4+ CD25+Treg腹腔注射给RAG1-/-小鼠;WT或IRE8-/-小鼠的naive CD4+ CD45RBhiT细胞腹腔注射给RAG1-/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测.结果:(1) IRF8-/-较WT的naive CD4+T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<0.01),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05).(2)CD4+ CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠,IRF8-/-较WT供体鼠引起的RAG1-/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高(P<0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17+ CD4+细胞比例明显增高(P<0.01),