目的：为进一步探讨miRNA-24是否参与内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的调控及其对血管内皮细胞增殖的影响，本研究构建miRNA-24高表达质粒，并用脂质体将其导入人脐静脉内皮细胞（ HUVECs ），观察miRNA-24对eNOS表达及HUVECs增殖的影响。方法：用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测细胞增殖情况，RT-PCR、免疫组织化学和Western blotting检测eNOS与Sp1转录因子mRNA和蛋白表达水平。结果：与对照组比较， miR-NA-24高表达组细胞增殖减慢41.97％（0.47±0.04 vs 0.81±0.03， P＜0.01），eNOS mRNA降低44.8％（0.48±0.01 vs 0.87±0.03，P＜0.05），蛋白表达减少71.92％（0.16±0.06 vs 0.57±0.08，P＜0.05）；同时Sp1 mRNA降低53.00％（0.45±0.02 vs 0.93±0.01，P＜0.05），其蛋白质表达量也相应减少62.31％（0.13±0.07 vs 0.31±0.09， P＜0.05）。 miRNA-24抑制组中，上述指标比对照组降低，但比miRNA-24高表达组明显升高。结论：miRNA-24高表达明显抑制HUVECs的增殖及eNOS的表达；Sp1可能是参与miRNA-24调控eNOS表达的重要因素之一。
作者：张文宇；王辉；李玉媚；陈伟；胡楠；欧和生
来源：中国病理生理杂志 2014 年 8期
