目的：通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变，探讨ZFP580的作用及机制。方法：培养大鼠H9c2心肌细胞，分为3组：（1）缺氧/复氧（H/R）组：H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液（pH＝6．2）缺氧（95％N2＋5％CO2）培养3 h，复氧培养2 h；（2）缺氧预适应（HPC）组：H9c2心肌细胞经3个循环的短暂缺氧（10 min）/复氧（20 min）处理后，进行同上H/R实验；（3）对照（C）组：正常培养的H9c2心肌细胞。通过MTT染色及LDH水平判定HPC的作用。 Western blotting方法观察心肌细胞中转录因子ZFP580表达及ERK1/2磷酸化情况，以及ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059对ZFP580表达的影响。分别构建高/低表达ZFP580的慢病毒载体并转染H9c2心肌细胞，经H/R实验后利用Annexin V-PE/7-AAD染色及流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况，Western bloting方法观察caspase-3活化情况。结果： HPC能显著改善H/R处理后H9c2心肌细胞存活率降低和LDH漏出的现象。 Western blotting 结果显示，HPC组心肌细胞中ZFP580表达及ERK1/2磷酸化程度较H/R处理组明显上升，且PD98059预处理明显抑制HPC诱导的ZFP580的表达上调。慢病毒介导的基因转染实验发现，ZFP580高表达的H9c2心肌细胞在H/R损伤后凋亡率降低且
作者：孟祥艳；于海龙；买霞；张文成；徐瑞成
来源：中国病理生理杂志 2014 年 9期
