目的：探讨线粒体损伤在创伤弧菌（Vibrio vulnificus，Vv）诱导树突状细胞（dendritic cell，DC）凋亡过程中的作用及其可能机制。方法：建立Vv 1．1758与DC2．4细胞混合培养模型。采用扫描电镜和透射电镜观察创伤弧菌侵入细胞方式和细胞线粒体病变情况。荧光探针DCFH-DA和Fluo-8/AM分别检测侵入细胞内活性氧（ ROS）和Ca2＋离子水平。流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况。采用Western blotting 检测NF-κB p65和TNF-α蛋白的表达。结果：Vv 1．1758可诱导DC2．4细胞凋亡。 Vv 1．1758以菌体一端与细胞表面结合的方式侵入细胞，侵入细胞的线粒体有明显病变，细胞内ROS和Ca2＋水平升高，线粒体膜电位降低。共培育1 h，NF-κB p65蛋白即开始升高，5 h达高峰，6 h稍有下降；TNF-α蛋白则在共培育2 h开始增高，6 h达高峰。结论：线粒体损伤在Vv诱导DC凋亡中发挥作用，其作用机制可能与细胞内ROS和Ca2＋水平升高、线粒体膜电位降低有关， NF-κB p65和TNF-α可能是细胞凋亡过程中的重要信号分子。
作者：徐水凌；朱佳；张新红；邵平扬；郑文文
来源：中国病理生理杂志 2014 年 9期
