目的：建立一种方法简单、重复性好、培养周期短的小鼠肺细小动脉平滑肌细胞（ PASMCs ）原代培养及传代方法，并初步探索低氧下小鼠PASMCs的增殖与凋亡情况。方法：无菌条件显微镜下分离小鼠肺细小动脉，经胶原酶I消化结合血清铺底法培养PASMCs。传代过程中弃除对细胞损伤大的离心步骤。倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学法和免疫荧光染色法进行α-平滑肌肌动蛋白鉴定，CCK-8显法及TUNEL法测定低氧下PASMCs的增殖与凋亡情况。结果：形态学观察、免疫细胞化学法和免疫荧光染色法鉴定均表明培养的细胞为PASMCs。与大鼠传代后的PASMCs典型的“峰-谷”样生长相比，传代后的小鼠PASMCs形态各异，没有此典型“峰-谷”规律。原代培养后5～7 d即传代，依据细胞活性可传3～5代。 CCK-8法显示，与常氧组24 h比较，低氧组A值升高（P＜0．05）。 TUNEL法结果显示低氧24 h后凋亡率较常氧组下降（P＜0．05）。结论：胶原酶I消化结合血清铺底法培养小鼠PASMCs，方法简单，培养周期短，重复性好，是一种值得推广的小鼠PASMCs体外培养方法。低氧可以促进小鼠PASMCs的增殖，抑制小鼠PASMCs的凋亡。
作者：虞晓明；郭瑞；唐江锋；黄晓颖；王良兴
来源：中国病理生理杂志 2014 年 9期
