目的:观察中药单体梓醇在成骨-破骨共育体系中对成骨细胞(OB)增殖、OB碱性磷酸酶(ALP)活性、破骨细胞( OC)活性及OB雌激素受体( ER)α及βmRNA表达的影响,从细胞水平阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法:分别选取1 d和5 d SD大鼠分离培养OB和OC,并建立OB-OC共育体系;在共育体系中,用MTT法检测低浓度(0.05、0.1、0.5、1 mg/L)、中浓度(2、5、10 mg/L)和高浓度(20、50和100 mg/L)梓醇干预下的OB增殖率,并以梓醇最佳促OB增殖浓度进行后续实验,实验分为对照组和梓醇组。 pNPP法检测各组OB的ALP活性;光镜观察OC骨吸收陷窝数目;重氮盐法检测OC抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP)的活性;RT-PCR方法检测OB ERα及ERβmRNA的表达。结果:在OB-OC共育体系中,0.05~2 mg/L梓醇各组中OB的增殖率显著高于对照组(P<0.01),且0.05 mg/L梓醇组促进OB增殖的能力明显高于其它浓度组(P<0.01),5~100 mg/L梓醇各组OB的增殖率与对照组比较无显著差异( P>0.05)。0.05 mg/L梓醇组的ALP水平高于对照组( P<0.05),并在作用48、72和96 h后均对OC骨吸收陷窝数及TRAP有明显抑制作用( P<0.01);0.05 mg/L梓醇组OB中ERαmRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义( P>0.05),而ERβmRNA
作者:赖满香;杨丽;张荣华
来源:中国病理生理杂志 2015 年 7期