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目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持.方法:老年hBM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻hBM-MSCs组(young组),老年hBM-MSCs组(old组)及低氧预处理老年hBM-MSCs组(old+ hypoxia组).300μmol/L H2O2作用30 min建立细胞氧化应激模型,50 μmol/L LY294002作用2h阻断PI3 K/AKT信号通路,BrdU掺入实验检测细胞增殖能力;CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平和AKT磷酸化水平.结果:BrdU掺入实验显示低氧预处理的老年hBM-MSCs细胞阳性率为39.85% ±3.45%,与old组相比增殖能力显著提高(P<0.05).300 μmol/L H2O2作用30 min诱导细胞氧化应激后,old+hypoxia组与old组比较,细胞活力显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax表达量显著降低(P<0.05),抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达量显著增高(P<0.05),且AKT磷酸化水平显著增高,差异有统计学显著性(P<0.05);应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,细胞活力下降(P<0.05).结论:低氧预处理可以通过激活AKT信号通路提高老年人骨髓间充质干细胞活力及增殖能力.

作者:宋慧芳;郭蕊;张亮

来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 5期

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作者:
宋慧芳;郭蕊;张亮
来源:
中国病理生理杂志 2016 年 32卷 5期
标签:
低氧 PI3K/AKT信号通路 骨髓间充质干细胞 氧化应激 Hypoxia PI3K/AKT signal pathway Bone marrow mesenchymal stem cells Oxidative stress
目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持.方法:老年hBM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻hBM-MSCs组(young组),老年hBM-MSCs组(old组)及低氧预处理老年hBM-MSCs组(old+ hypoxia组).300μmol/L H2O2作用30 min建立细胞氧化应激模型,50 μmol/L LY294002作用2h阻断PI3 K/AKT信号通路,BrdU掺入实验检测细胞增殖能力;CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平和AKT磷酸化水平.结果:BrdU掺入实验显示低氧预处理的老年hBM-MSCs细胞阳性率为39.85% ±3.45%,与old组相比增殖能力显著提高(P<0.05).300 μmol/L H2O2作用30 min诱导细胞氧化应激后,old+hypoxia组与old组比较,细胞活力显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax表达量显著降低(P<0.05),抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达量显著增高(P<0.05),且AKT磷酸化水平显著增高,差异有统计学显著性(P<0.05);应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,细胞活力下降(P<0.05).结论:低氧预处理可以通过激活AKT信号通路提高老年人骨髓间充质干细胞活力及增殖能力.