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目的:本研究采用靶向 CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶 Cε(protein kinase Cε,PKCε)小干扰 RNA 基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法:制作可靶向 CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞 CD147表达量。分别设立 CP 组、CN 组和 LP 组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng 进行细胞转染。另设 CD147靶向载体对照CA 组和未转染细胞的对照(control)组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR 检测 PKCε的 mRNA 表达。 Western blot 法检测 PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和 GAPDH 的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。 Transwell 法检测细胞的迁移能力。结果:免疫荧光法染色观察证实,人肺癌 A549细胞的胞膜高表达 CD147蛋白。 CP 组细胞中 siRNA 高效进入 A549细胞,质粒内吞效率大于 CN 组和 LP 组。 CP组、CN 组、LP 组和 CA 组的 A549细胞中 PKCε的 mRNA 相对表达量分别为 control 组的(9.76±0.18)%、(98.51±0.32)%、(99.17±0.16)%和(99.68±0.11)%,CP 组与 control 组间的差异有统计学显著性(P <0.05),CN 组、LP组与 con

作者:吴飞龙;孔庆磊;蔡松旺;叶志强

来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 9期

知识库介绍

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作者:
吴飞龙;孔庆磊;蔡松旺;叶志强
来源:
中国病理生理杂志 2016 年 32卷 9期
标签:
CD147 纳米载体 基因治疗 蛋白激酶Cε CD147 Nanocarriers Gene therapy Protein kinase Cε
目的:本研究采用靶向 CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶 Cε(protein kinase Cε,PKCε)小干扰 RNA 基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法:制作可靶向 CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞 CD147表达量。分别设立 CP 组、CN 组和 LP 组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng 进行细胞转染。另设 CD147靶向载体对照CA 组和未转染细胞的对照(control)组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR 检测 PKCε的 mRNA 表达。 Western blot 法检测 PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和 GAPDH 的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。 Transwell 法检测细胞的迁移能力。结果:免疫荧光法染色观察证实,人肺癌 A549细胞的胞膜高表达 CD147蛋白。 CP 组细胞中 siRNA 高效进入 A549细胞,质粒内吞效率大于 CN 组和 LP 组。 CP组、CN 组、LP 组和 CA 组的 A549细胞中 PKCε的 mRNA 相对表达量分别为 control 组的(9.76±0.18)%、(98.51±0.32)%、(99.17±0.16)%和(99.68±0.11)%,CP 组与 control 组间的差异有统计学显著性(P <0.05),CN 组、LP组与 con