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目的:检测 WNT5B 在人正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞株中的表达,及过表达 WNT5B 后对人乳腺癌 MCF-7细胞活力及凋亡的影响,探讨 WNT5B 在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用 RT-PCR 法检测正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中 WNT5B 的 mRNA 表达水平,将 WNT5B 的表达载体 pcDNA3.1/WNT5B 和空白对照载体 pcDNA3.1分别瞬时转染人乳腺癌 MCF-7细胞,通过 real-time PCR 和 Western blotting 法分别在 mRNA 和蛋白水平验证 WNT5B 的表达效率;并通过 CCK-8的方法检测 WNT5B 过表达对人乳腺癌 MCF-7细胞活力的影响,通过流式细胞术分别检测过表达 WNT5B 对 MCF-7细胞周期分布及凋亡比例的影响。结果:与正常乳腺上皮细胞相比, WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达;在乳腺癌细胞 MCF-7中转染 WNT5B 表达质粒后,WNT5B 表达上调,差异有统计学显著性(P <0.05);与对照组相比,过表达 WNT5B 后,MCF7细胞的活力明显降低,处于 S 期细胞的量明显增加, G1和 G2/M 期细胞明显减少,且细胞凋亡比例明显增加,差异均有统计学显著性(P <0.05)。结论:WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达,过表达 WNT5B 可使人乳腺癌细胞 MCF-7阻滞在 S 期,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

作者:周凡涵;厉红元

来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 9期

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作者:
周凡涵;厉红元
来源:
中国病理生理杂志 2016 年 32卷 9期
标签:
WNT5B MCF-7细胞 细胞凋亡 WNT5B MCF-7 cells Apoptosis
目的:检测 WNT5B 在人正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞株中的表达,及过表达 WNT5B 后对人乳腺癌 MCF-7细胞活力及凋亡的影响,探讨 WNT5B 在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用 RT-PCR 法检测正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中 WNT5B 的 mRNA 表达水平,将 WNT5B 的表达载体 pcDNA3.1/WNT5B 和空白对照载体 pcDNA3.1分别瞬时转染人乳腺癌 MCF-7细胞,通过 real-time PCR 和 Western blotting 法分别在 mRNA 和蛋白水平验证 WNT5B 的表达效率;并通过 CCK-8的方法检测 WNT5B 过表达对人乳腺癌 MCF-7细胞活力的影响,通过流式细胞术分别检测过表达 WNT5B 对 MCF-7细胞周期分布及凋亡比例的影响。结果:与正常乳腺上皮细胞相比, WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达;在乳腺癌细胞 MCF-7中转染 WNT5B 表达质粒后,WNT5B 表达上调,差异有统计学显著性(P <0.05);与对照组相比,过表达 WNT5B 后,MCF7细胞的活力明显降低,处于 S 期细胞的量明显增加, G1和 G2/M 期细胞明显减少,且细胞凋亡比例明显增加,差异均有统计学显著性(P <0.05)。结论:WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达,过表达 WNT5B 可使人乳腺癌细胞 MCF-7阻滞在 S 期,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。