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目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II( CaMKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体( RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP )染色及骨磨片吸收陷窝检测评价破骨细胞生成情况;同时于诱导第0、1、3、5天末通过免疫荧光细胞化学、RT-qPCR和Western blot法检测CaMKIIδ的mRNA及蛋白表达水平。结果:TRAP染色及骨吸收陷窝检测显示于诱导第5天有多核破骨细胞生成。第0、1、3、5天CaMKIIδ的mRNA表达水平分别为1.028±0.041、2.478±0.087、10.524±1.284和42.914±2.667,蛋白相对水平分别为0.762、0.963、1.802和3.136,免疫荧光细胞化学检测显示CaMKIIδ的荧光6强度呈时间依赖性递增。结论:CaMKIIδ的表达随破骨细胞分化逐步增高,提示CaMKIIδ在破骨细胞分化中可能起着关键调控作用。

作者:陆大壮;刘娟娟;戚孟春;温黎明;李任;孙红

来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 10期

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作者:
陆大壮;刘娟娟;戚孟春;温黎明;李任;孙红
来源:
中国病理生理杂志 2016 年 32卷 10期
标签:
钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIδ 破骨细胞 核因子κB受体激活因子配体 抗酒石酸酸性磷酸酶 Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II delta Osteoclasts Receptor activator of nuclear factor κB ligand Tartrate-resistant acid phosphatase
目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II( CaMKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体( RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP )染色及骨磨片吸收陷窝检测评价破骨细胞生成情况;同时于诱导第0、1、3、5天末通过免疫荧光细胞化学、RT-qPCR和Western blot法检测CaMKIIδ的mRNA及蛋白表达水平。结果:TRAP染色及骨吸收陷窝检测显示于诱导第5天有多核破骨细胞生成。第0、1、3、5天CaMKIIδ的mRNA表达水平分别为1.028±0.041、2.478±0.087、10.524±1.284和42.914±2.667,蛋白相对水平分别为0.762、0.963、1.802和3.136,免疫荧光细胞化学检测显示CaMKIIδ的荧光6强度呈时间依赖性递增。结论:CaMKIIδ的表达随破骨细胞分化逐步增高,提示CaMKIIδ在破骨细胞分化中可能起着关键调控作用。