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目的:观察比较核酸内切酶结构域内含蛋白1(endonuclease domain containing 1,ENDOD1)在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的表达差异;筛选存在ENDOD1特异性低表达的前列腺癌细胞系,继而通过调控该细胞ENDOD1蛋白表达,研究其在前列腺癌细胞中的生物学功能,初步探索ENDOD1基因与前列腺癌发生、进展的联系。方法:利用免疫组化SP法检测20例良性前列腺增生和21例前列腺癌术后标本组织中ENDOD1表达情况;利用RT-qPCR和Western blot方法观察ENDOD1的mRNA和蛋白在前列腺正常上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞中的表达差异,筛选出特异性低表达细胞系;构建pCMV-N-Flag-ENDOD1重组质粒,转染前列腺癌细胞株,过表达ENDOD1蛋白,通过MTT法测定调控前后前列腺癌细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell实验评价肿瘤细胞迁移和侵袭能力的改变。结果:免疫组化评分的方差分析结果显示ENDOD1表达与前列腺癌Gleason评分呈负性关联;RT-qPCR和Western blot实验结果表明ENDOD1在雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和DU145中存在着特异性低表达(P<0.05)。同时,MTT实验显示,在DU145细胞中,过表达 ENDOD1肿瘤细胞活力显著下降( P<0.05);而流式细胞术检测结果表明过表达ENDOD1能够使DU1

作者:彭叔彬;曾花;邱剑光;胡成;黄文涛;李科;王德娟

来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期

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作者:
彭叔彬;曾花;邱剑光;胡成;黄文涛;李科;王德娟
来源:
中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期
标签:
前列腺肿瘤 核酸内切酶结构域内含蛋白1 肿瘤侵袭 Prostate cancer Endonuclease domain containing 1 Neoplasm invasion
目的:观察比较核酸内切酶结构域内含蛋白1(endonuclease domain containing 1,ENDOD1)在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的表达差异;筛选存在ENDOD1特异性低表达的前列腺癌细胞系,继而通过调控该细胞ENDOD1蛋白表达,研究其在前列腺癌细胞中的生物学功能,初步探索ENDOD1基因与前列腺癌发生、进展的联系。方法:利用免疫组化SP法检测20例良性前列腺增生和21例前列腺癌术后标本组织中ENDOD1表达情况;利用RT-qPCR和Western blot方法观察ENDOD1的mRNA和蛋白在前列腺正常上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞中的表达差异,筛选出特异性低表达细胞系;构建pCMV-N-Flag-ENDOD1重组质粒,转染前列腺癌细胞株,过表达ENDOD1蛋白,通过MTT法测定调控前后前列腺癌细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell实验评价肿瘤细胞迁移和侵袭能力的改变。结果:免疫组化评分的方差分析结果显示ENDOD1表达与前列腺癌Gleason评分呈负性关联;RT-qPCR和Western blot实验结果表明ENDOD1在雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和DU145中存在着特异性低表达(P<0.05)。同时,MTT实验显示,在DU145细胞中,过表达 ENDOD1肿瘤细胞活力显著下降( P<0.05);而流式细胞术检测结果表明过表达ENDOD1能够使DU1