目的：观察雷帕霉素（Rapa）对氧糖剥夺（OGD）的人神经母细胞瘤SH－SY5Y细胞的影响，并探讨自噬在其中的作用。方法： SH－SY5Y细胞随机分为4组：正常对照组（常规培养，不进行OGD处理）、Rapa组、OGD组（无糖培养基、1％O2的三气培养箱内孵育细胞12 h）和Rapa＋OGD组。进行形态学观察；MTT法检测细胞活力；乳酸脱氢酶（ LDH）漏出率判断细胞损伤的程度；caspase－3活性检测试剂盒检测酶活性；原位末端标记（TUNEL）法检测凋亡水平；Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl－2、自噬标志蛋白LC3B－Ⅱ及自噬调控蛋白beclin－1的表达。结果：与OGD组相比，Rapa＋OGD组的细胞存活率明显升高（P＜0．05），LDH漏出率及caspase－3酶活性明显降低（ P＜0．05）。 TUNEL染色观察结果显示，与OGD组相比，Rapa＋OGD组的细胞凋亡明显减少（ P＜0．05）；Western blot 实验结果显示Rapa＋OGD组的Bcl－2、beclin－1及LC3B－Ⅱ蛋白的表达水平显著高于OGD组（P＜0．05），而Bax蛋白水平明显低于OGD组（P＜0．05）。结论： Rapa对OGD 损伤的SH－SY5Y细胞具有保护作用，其机制可能与上调beclin－1蛋白、激活自噬有关。
作者：卢娜；魏林郁；王宝英；李璐；杨坤丽；李东亮
来源：中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期
