目的:探讨γδT细胞对结直肠癌细胞的杀伤活性,并研究川楝素对γδT细胞的协同效应.方法:体外培养人γδT细胞并用流式细胞术进行鉴定.乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测γδT细胞和川楝素对人结直肠癌SW480细胞的杀伤活性.Western blot实验检测川楝素对SW480细胞中Bcl-2、Bcl-xL和MCL-1表达水平的影响.ELISA实验检测川楝素是否影响γδT细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和Fas配体(FasL)的分泌.流式细胞术检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞的线粒体膜电位和凋亡情况.Western blot实验检测川楝素和γδT细胞处理后SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化.结果:体外培养的γδT细胞高表达CD3和γδT细胞受体(TCR).川楝素处理能显著增强γδT细胞对SW480的杀伤活性.川楝素不影响γδT细胞TRAIL和FasL的表达.川楝素不影响SW480细胞中Bcl-2和Bcl-xL的蛋白水平但显著抑制MCL-1的表达.转染MCL-1质粒能显著抑制川楝素对γδT细胞的协同效应.川楝素通过抑制MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞线粒体膜电位的损伤和凋亡的诱导.川楝素通过抑制SW480细胞MCL-1的表达促进γδT细胞对SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化.结论:川楝素通过抑制MCL-1的表达发挥对γδT细胞的协同抗结直肠癌作用.
作者:郁峰;徐统球;陈诚豪;崔焌辉
来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 11期