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目的:探讨转染微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对c-Kit+心脏干细胞增殖、分化和迁移的影响.方法:采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养c-Kit+心脏干细胞,以Lipofectamine?2000为载体将miR-21模拟物(mimics)和其阴性对照(mimics negative control,MNC)分别转染至 c-Kit+心脏干细胞.实验分为正常对照(control)组(正常培养的心脏干细胞)、MNC组(转染MNC 48h的细胞)和mimics组(转染miR-21 mimics 48 h的细胞). qPCR检测各组细胞miR-21的表达情况,以CCK-8法和EdU法检测细胞增殖状态,qPCR及免疫荧光检测细胞分化情况,划痕实验观察细胞迁移能力.结果:成功获取c-Kit+心脏干细胞,经流式细胞术鉴定其高表达 c-Kit (90.8

作者:王艳;石蓓;邓文文;王冬梅;盛瑾;陈文明

来源:中国病理生理杂志 2018 年 34卷 6期

知识库介绍

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作者:
王艳;石蓓;邓文文;王冬梅;盛瑾;陈文明
来源:
中国病理生理杂志 2018 年 34卷 6期
标签:
微小RNA-21 心脏干细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞分化 MicroRNA-21 Cardiac stem cells Cell proliferation Cell migration Cell differentiation
目的:探讨转染微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对c-Kit+心脏干细胞增殖、分化和迁移的影响.方法:采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养c-Kit+心脏干细胞,以Lipofectamine?2000为载体将miR-21模拟物(mimics)和其阴性对照(mimics negative control,MNC)分别转染至 c-Kit+心脏干细胞.实验分为正常对照(control)组(正常培养的心脏干细胞)、MNC组(转染MNC 48h的细胞)和mimics组(转染miR-21 mimics 48 h的细胞). qPCR检测各组细胞miR-21的表达情况,以CCK-8法和EdU法检测细胞增殖状态,qPCR及免疫荧光检测细胞分化情况,划痕实验观察细胞迁移能力.结果:成功获取c-Kit+心脏干细胞,经流式细胞术鉴定其高表达 c-Kit (90.8