目的:研究盐酸小檗碱对小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1分化与矿化的调控作用及其机制.方法:MC3T3-E1细胞给予不同浓度(0、1、5、10和20 mg/L)的盐酸小檗碱刺激3 d,CCK-8法检测细胞活性.不同浓度的盐酸小檗碱分别干预3 d和7 d,检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性.进一步将实验随机分为4组:对照组、盐酸小檗碱组、盐酸小檗碱+LY249002(PI3K/Akt通路抑制剂)组及LY249002组.干预2 d后,采用real-time PCR检测成骨细胞分化相关因子ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)及Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达情况,采用Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-Akt的表达水平.将MC3TC-E1细胞用矿化培养基诱导21 d,茜素红染色检测其矿化情况.结果:与对照组相比,不同浓度的盐酸小檗碱对细胞活性的影响没有明显差异;不同浓度的盐酸小檗碱处理MC3T3-E1细胞后ALP活性有不同程度升高.Real-time PCR结果表明,盐酸小檗碱(5 mg/L)促进ALP、OCN、OPN及Runx2的mRNA表达(P<0.01),而LY294002能抑制这些分化相关因子的表达.Western blot检测结果表明,盐酸小檗碱(5 mg/L)促进p-Akt蛋白的表达(P<0.01),其作用被LY249002抑制.茜素红染色发现盐酸小檗碱组矿化明显,但LY294002能抑制盐酸小檗碱的促进作用.结论:盐酸小檗碱可以促进小鼠前成骨细胞

作者：江健；廖莉娅；容婵；陈捷侨；Ashish SHRESTHA；刘星琦；苏雅；舒晓春

来源：中国病理生理杂志 2018 年 34卷 10期