目的:探讨X染色体失活特异转录物(XIST)在结直肠癌(CRC)细胞对阿霉素(又称多柔比星,DOX)耐药中的作用及其可能的分子机制.方法:通过DOX浓度递增处理CRC细胞LoVo和HCT116,获得DOX耐药细胞LoVo/DOX和HCT116/DOX.采用RT-qPCR检测XIST和微小RNA-124(miR-124)在DOX耐药CRC细胞中的表达;转染XIST小干扰RNA(si-XIST)后,通过Western blot检测LoVo/DOX细胞和HCT116/DOX细胞中P-糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S-转移酶π(GST-π)的蛋白水平.通过萤光素酶报告基因实验来证明XIST与miR-124的相互作用.转染miR-124、si-XIST或si-XIST+ anti-miR-124后,通过Western blot检测LoVo/DOX细胞和HCT116/DOX细胞中P-gp和GST-π的蛋白水平.结果:在DOX耐药CRC细胞中,XIST表达上调(P＜0.05),miR-124表达下调(P＜0.05).XIST沉默显著降低DOX耐药CRC细胞中的P-gp和GST-r蛋白水平(P＜0.05).萤光素酶报告基因实验结果显示,XIST存在miR-124结合区域.转染miR-124显著降低DOX耐药CRC细胞中P-gp及GST-π蛋白水平(P＜0.05);而转染anti-miR-124则可逆转由XIST沉默导致的DOX耐药CRC细胞的P-gp及GST-π的降低(P＜0.05).结论:在DOX耐药CRC细胞中,沉默XIST可能通过调节miR-124来抑制DOX的耐药性.

作者：舒涛；王晓梅；付曲波；黄利兴；谢斌辉

来源：中国病理生理杂志 2019 年 35卷 10期