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目的:探讨小鼠环状RNA-42398(mmu_circ_42398)对肝星状细胞活化的影响及机制是否与调节TGF-β1/Smads信号通路有关.方法:小鼠肝星状细胞株JS1,分成正常对照组、空载体阴性对照组(vector组)和mmu_circ_42398过表达组(mmu_circ_42398组),体外构建mmu_circ_42398过表达载体,通过脂质体瞬时转染法转入JS1细胞,48 h后RT-qPCR检测mmu_circ_42398的表达变化,PCR产物经一代测序验证其环化位点,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达.结果:与vector组相比,mmu_circ_42398组的mmu_circ_42398表达增加(P<0.01),PCR产物测序验证了其环化位点,提示mmu_circ_42398过表达质粒成功转入JS1细胞并高效表达;在JS1细胞中过表达mmu_circ_42398后,α-SMA和Col I蛋白表达显著降低(P<0.01),TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达无显著变化(P>0.05),但p-Smad2和p-Smad3蛋白水平显著降低(P<0.01).结论:mmu_circ_42398能抑制肝星状细胞的活化,其机制与调控TGF-β1/smads信号通路有关.

作者:周玉平;吕雪幼;杨萍;温晋锋;王庆领;叶国良

来源:中国病理生理杂志 2020 年 36卷 4期

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作者:
周玉平;吕雪幼;杨萍;温晋锋;王庆领;叶国良
来源:
中国病理生理杂志 2020 年 36卷 4期
标签:
肝纤维化 肝星状细胞 环状RNA TGF-β1/Smads信号通路
目的:探讨小鼠环状RNA-42398(mmu_circ_42398)对肝星状细胞活化的影响及机制是否与调节TGF-β1/Smads信号通路有关.方法:小鼠肝星状细胞株JS1,分成正常对照组、空载体阴性对照组(vector组)和mmu_circ_42398过表达组(mmu_circ_42398组),体外构建mmu_circ_42398过表达载体,通过脂质体瞬时转染法转入JS1细胞,48 h后RT-qPCR检测mmu_circ_42398的表达变化,PCR产物经一代测序验证其环化位点,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达.结果:与vector组相比,mmu_circ_42398组的mmu_circ_42398表达增加(P<0.01),PCR产物测序验证了其环化位点,提示mmu_circ_42398过表达质粒成功转入JS1细胞并高效表达;在JS1细胞中过表达mmu_circ_42398后,α-SMA和Col I蛋白表达显著降低(P<0.01),TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达无显著变化(P>0.05),但p-Smad2和p-Smad3蛋白水平显著降低(P<0.01).结论:mmu_circ_42398能抑制肝星状细胞的活化,其机制与调控TGF-β1/smads信号通路有关.