目的:探讨蛋白磷酸酶4(protein phosphatase 4,PP4)在棕榈酸(palmitic acid,PA)引起内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)Ser633位点磷酸化水平降低中的调控作用.方法:选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究对象,分别用终浓度为25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L的PA处理HUVECs 36 h,另用100 μmol/L PA处理HUVECs 12 h、24 h、36 h和48 h,用蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)家族抑制剂福司曲星(fostriecin,FST)20 nmol/L或冈田酸(okadaic acid, OA)5 nmol/L分别预处理细胞30 min,然后用蛋白磷酸酶4催化亚基(protein phosphatase 4 catalytic subunit,PP4c)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和蛋白磷酸酶2A催化亚基(protein phosphatase 2A catalytic subunit, PP2Ac)siRNA分别转染HUVECs.用Western blot法检测eNOS总蛋白、PP4c和PP2Ac蛋白表达水平及eNOS Ser633磷酸化水平,用DAF-FM DA荧光探针检测细胞内一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量.结果:(1)与control组比较,PA(终浓度25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L)处理HUVECs 36 h后,eNOS Ser633磷酸化水平均显著降低(P＜0. 05),100 μmol/L

作者：秦思；张倩；王敬杰；于敏；骆妍蓓；丁菁；陆德琴

来源：中国病理生理杂志 2020 年 36卷 5期