目的:体外实验探究罗哌卡因对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞线粒体自噬的作用及其对信号转导及转录激活因子3(STAT3)磷酸化的影响.方法:PC12细胞被随机分为对照组和罗哌卡因处理(0.5、1、2、4和8 mmol/L)组,CCK-8实验测定细胞活力,光学显微镜下观察细胞形态,通过线粒体活性氧和线粒体膜电位来评估罗哌卡因对细胞线粒体功能的影响,通过免疫荧光和Western blot实验比较不同处理组中细胞的线粒体自噬水平以及STAT3和p-STAT3的蛋白水平.结果:与对照组比较,罗哌卡因处理24 h后PC12细胞的活力显著下降(P<0.01),呈剂量依赖性;同时光学显微镜下可以观察到细胞形态的改变:细胞变圆,突起减少,坏死凋亡细胞数量增加.与对照组相比,罗哌卡因组PC12细胞中的线粒体活性氧显著增加,线粒体膜电位显著下降,呈剂量依赖性.进一步比较不同处理组中细胞线粒体自噬水平,结果表明罗哌卡因促进了PC12细胞线粒体自噬,包括增加线粒体与自噬体间的共定位,调节线粒体自噬相关蛋白的表达.Western blot和免疫荧光的结果显示,与对照组比较,罗哌卡因组中p-STAT3的蛋白水平显著降低(P<0.01),呈剂量依赖性,以2 mmol/L罗哌卡因组差异最显著.结论:罗哌卡因通过促进PC12细胞的线粒体自噬来引发细胞损伤,其机制可能与抑制细胞中STAT3的磷酸化有关.
作者：曾炼；刘晨光；孙晓东；丁旭东；桑明；罗辉宇
来源：中国病理生理杂志 2021 年 37卷 7期
