目的:探讨三七总皂苷(PNS)在低氧高二氧化碳(HH)环境下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)自噬和增殖的作用及其机制.方法:将大鼠PASMCs随机分为5组:对照(CON)组、HH组、HH+PNS组、PI3K抑制剂LY294002组(HH+LY组)及HH+PNS+LY组.CON组置于常氧细胞培养箱(21%O2、5%CO2)培养24 h,其余4组置于造模培养箱(5%O2、6%CO2)并加入各组对应的药物培养24 h.CCK-8法检测细胞活力;RT-qPCR和Western blot法检测自噬相关指标AKT、mTOR、LC3和P62的mRNA和蛋白水平;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平;通过透射电镜观察细胞内部自噬小体形成情况.结果:与CON组比,HH组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平降低,而LC3的mRNA和蛋白水平升高,PCNA表达上调,自噬小体数量增多(P<0.05);与HH组比,HH+PNS组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平升高,LC3的mRNA和蛋白水平降低,自噬小体数量减少,PCNA表达下调(P<0.05);与HH组相比,HH+LY组PASMCs的活力减弱,AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR和P62的蛋白水平降低,而LC3的mRNA和蛋白水平升高,自噬小体数量增多,PCNA表达上调(P<0.05);与HH+PNS组相比,HH+PNS+LY组AKT、mTOR和P62的mRNA及p-AKT、p-mTOR
作者:陈玲珑;武垣伶;张赛;黄丹娜;王万铁
来源:中国病理生理杂志 2021 年 37卷 7期