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目的:观察线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)对自然杀伤(NK)细胞活化的影响.方法:以人NK细胞系NK-92MI为研究对象,采用CCK-8法筛选Mdivi-1适宜的干预浓度.据此结果,分为对照组、重组人胸腺基质淋细胞生成素(TSLP)组和Mdivi-1低、中、高剂量组.其中,TSLP组以20μg/L TSLP刺激24 h,Mdivi-1组于20μg/L TSLP刺激下以相应浓度Mdivi-1干预24 h.采用RT-qPCR检测Mdivi-1干预后细胞中白细胞介素4(IL-4)、IL-5和干扰素γ(IFN-γ)的mRNA表达;以Western blot分析测定各组细胞IL-4、IL-5和IFN-γ的蛋白表达及JAK2和STAT6的磷酸化水平;以MitoSOX Red染色探查各组细胞的活性氧(ROS)水平.结果:CCK-8结果显示,1、5和10μmol/L为Mdi-vi-1干预NK-92MI细胞的适宜浓度.RT-qPCR结果显示,与对照组比较,TSLP组细胞IL-4和IL-5的mRNA表达显著升高,IFN-γ的mRNA水平下调(P<0.05);而5和10μmol/L Mdivi-1干预则有效逆转了上述异常变化.Western blot结果显示,与TSLP组比较,5和10μmol/L Mdivi-1组的IL-4表达下调,IFN-γ水平则有所回升,10μmol/L Mdivi-1组的IL-5表达降低(P<0.05).与TSLP组对比,5和10μmol/L Mdivi-1组的JAK2磷酸化水平降低,10μmol/L Mdivi-1组STAT6的磷酸化水平降低(P<0.05).同时,5和10μmol/L Mdivi-1干预有效抑制了TSLP

作者:陈旭青;周龙云;史军;吴继勇;严芮雯;严道南;马华安

来源:中国病理生理杂志 2021 年 37卷 9期

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作者:
陈旭青;周龙云;史军;吴继勇;严芮雯;严道南;马华安
来源:
中国病理生理杂志 2021 年 37卷 9期
标签:
线粒体分裂抑制剂1;自然杀伤细胞;活性氧;JAK2/STAT6信号通路
目的:观察线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)对自然杀伤(NK)细胞活化的影响.方法:以人NK细胞系NK-92MI为研究对象,采用CCK-8法筛选Mdivi-1适宜的干预浓度.据此结果,分为对照组、重组人胸腺基质淋细胞生成素(TSLP)组和Mdivi-1低、中、高剂量组.其中,TSLP组以20μg/L TSLP刺激24 h,Mdivi-1组于20μg/L TSLP刺激下以相应浓度Mdivi-1干预24 h.采用RT-qPCR检测Mdivi-1干预后细胞中白细胞介素4(IL-4)、IL-5和干扰素γ(IFN-γ)的mRNA表达;以Western blot分析测定各组细胞IL-4、IL-5和IFN-γ的蛋白表达及JAK2和STAT6的磷酸化水平;以MitoSOX Red染色探查各组细胞的活性氧(ROS)水平.结果:CCK-8结果显示,1、5和10μmol/L为Mdi-vi-1干预NK-92MI细胞的适宜浓度.RT-qPCR结果显示,与对照组比较,TSLP组细胞IL-4和IL-5的mRNA表达显著升高,IFN-γ的mRNA水平下调(P<0.05);而5和10μmol/L Mdivi-1干预则有效逆转了上述异常变化.Western blot结果显示,与TSLP组比较,5和10μmol/L Mdivi-1组的IL-4表达下调,IFN-γ水平则有所回升,10μmol/L Mdivi-1组的IL-5表达降低(P<0.05).与TSLP组对比,5和10μmol/L Mdivi-1组的JAK2磷酸化水平降低,10μmol/L Mdivi-1组STAT6的磷酸化水平降低(P<0.05).同时,5和10μmol/L Mdivi-1干预有效抑制了TSLP