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目的 探讨微小核糖核酸(microRNA)-1在动脉粥样硬化斑块中的表达及通过转化生长因子(TGF)-β2调控巨噬细胞凋亡功能的分子机制.方法 实验选用5周龄的雄性ApoE-/-小鼠50只,按实验要求分为对照组(25只)与动脉粥样硬化组(实验组,25只).实验组小鼠采用高脂喂食以建立动脉粥样硬化模型,对照组小鼠采用正常饲料喂养.造模成功后,实验组及对照组分别取动脉粥样硬化斑块组织及正常动脉组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测microRNA-1的表达.培养小鼠内皮细胞、平滑肌细胞及巨噬细胞,并用50 ng/ml氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激24 h,应用qRT-PCR技术比较miRNA-1在不同细胞中的表达变化.通过数据库及生物信息学软件预测microRNA-1的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因系统进行验证.实验组与对照组分别通过转染microRNA-1 mimics和microRNA-1 mimics的阴性对照至巨噬细胞株后观察其对细胞凋亡功能的影响.结果 MicroRNA-1在实验组动脉粥样硬化斑块中的表达比在对照组正常动脉组织中的表达明显增加(P<0.05).MicroRNA-1高表达于小鼠血管巨噬细胞,而低表达于血管平滑肌细胞及内皮细胞(P<0.05),经ox-LDL刺激后,其在巨噬细胞中的表达量较刺激前明显增加(P<0.05),内皮细胞及平滑肌细胞的表达量无明显差异(P均>0.05).

作者:郑华峰;陶晶;张斌;王纯;吴淳

来源:中国临床研究 2015 年 28卷 11期

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作者:
郑华峰;陶晶;张斌;王纯;吴淳
来源:
中国临床研究 2015 年 28卷 11期
标签:
微小核糖核酸-1 动脉粥样硬化 巨噬细胞 转化生长因子-β2 凋亡 Micro ribonucleic acid-1 Atherosclerosis Macrophage Transforming growth factor-beta 2 Apoptosis
目的 探讨微小核糖核酸(microRNA)-1在动脉粥样硬化斑块中的表达及通过转化生长因子(TGF)-β2调控巨噬细胞凋亡功能的分子机制.方法 实验选用5周龄的雄性ApoE-/-小鼠50只,按实验要求分为对照组(25只)与动脉粥样硬化组(实验组,25只).实验组小鼠采用高脂喂食以建立动脉粥样硬化模型,对照组小鼠采用正常饲料喂养.造模成功后,实验组及对照组分别取动脉粥样硬化斑块组织及正常动脉组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测microRNA-1的表达.培养小鼠内皮细胞、平滑肌细胞及巨噬细胞,并用50 ng/ml氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激24 h,应用qRT-PCR技术比较miRNA-1在不同细胞中的表达变化.通过数据库及生物信息学软件预测microRNA-1的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因系统进行验证.实验组与对照组分别通过转染microRNA-1 mimics和microRNA-1 mimics的阴性对照至巨噬细胞株后观察其对细胞凋亡功能的影响.结果 MicroRNA-1在实验组动脉粥样硬化斑块中的表达比在对照组正常动脉组织中的表达明显增加(P<0.05).MicroRNA-1高表达于小鼠血管巨噬细胞,而低表达于血管平滑肌细胞及内皮细胞(P<0.05),经ox-LDL刺激后,其在巨噬细胞中的表达量较刺激前明显增加(P<0.05),内皮细胞及平滑肌细胞的表达量无明显差异(P均>0.05).