目的 探讨上调胃癌细胞微小核糖核酸(microRNA,miR)-30a的表达对紫杉醇联合卡铂新辅助化疗敏感性的影响以及可能的作用机制.方法 经细胞活力测定(MTT)法检测紫杉醇联合卡铂对人胃腺癌细胞(AGS)增殖活性的抑制作用,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测miR-30a表达的变化.将miR-30a mimics转染至AGS细胞,分为空白对照组(CTL组)、空质粒转染组(NC组)和转染组,采用Annexin V/PE双染法检测紫杉醇联合卡铂对各组AGS细胞凋亡的影响.采用绿色荧光蛋白法观察自噬泡形成.采用Western blot检测Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3-β(LC3-Ⅱ)蛋白的表达量.并采用双荧光素酶基因报告分析miR-30a与Beclin-1的靶向关系.结果 分别将不同浓度紫杉醇和卡铂单独作用于AGS细胞48 h后,测得IC50分别为1.56 μM和48.74 mg/L.经IC50紫杉醇和IC50卡铂联合处理后,AGS细胞miR-30a表达量显著低于处理前[(0.37±0.14)vs(1.26±0.22),P<0.05];转染组AGS细胞自噬泡形成率低于CTL组和NC组(P<0.05);转染组AGS细胞凋亡率高于CTL组和NC组(P<0.05);转染组AGS细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量虽然高于处理前,但仍低于CTL组和NC组细胞(P<0.05).经双荧光素酶基因报告分析,Beclin-1可能是miR-30a的下游靶基因.结论 上调miR-30a的表达,
作者:苏卓彬;王国强;杨永江;赵轶峰;黄迪;王晓元;任慧敏;籍阳阳;李曙光
来源:中国临床研究 2019 年 32卷 11期