目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)在肾小管上皮细胞上皮—间质转化(EMT)中的作用及机制.方法 体外以转化生长因子(TGF)-β1刺激人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞,给予SFRP5与细胞共孵育,应用Western Blot法及RT-qPCR检测细胞中的EMT指标[E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的mRNA和蛋白表达水平,Western Blot法检测纤维化指标[Fibronectin(Fn)和Collagen Ⅰ(Col-Ⅰ)]的蛋白水平;并检测Wnt/β-catenin信号通路中细胞质中磷酸化β-catenin或细胞核中活化β-catenin蛋白水平,TOP/FOP-Flash荧光素酶试验评估β-catenin激活介导的转录及下游靶基因c-Myc和cyclin D1的mRNA水平.结果 TGF-β1刺激后上皮细胞固有E-cadherin水平下降,而a-SMA、Fn和Col-Ⅰ表达增多(P＜0.05);胞质中磷酸化(p-S37位点)β-catenin减少且核内β-catenin水平增加,TOP/FOP比率上升,靶基因c-Myc和cyclin D1转录增加(P＜0.05).加入SFRP5共培养细胞后,上述EMT及纤维化指标变化被逆转,异常激活的Wnt/β-catenin通路中各标志物被抑制,再加入SFRP5特异性中和抗体后SFRP5的抑制及保护作用被取消(P＜0.05).结论 本研究首次发现SFRP5可以减轻TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT和纤维化,其机制与抑制异常激活的Wnt/β-catenin信号

作者：邓岱；吴逸如；白雨；刁宗礼；黄红东；刘文虎

来源：中国临床研究 2023 年 36卷 7期