目的 探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5 -aza-2'-deoxycytidine,5-aza-CdR)对人急性淋巴细胞白血病细胞株CEM中抑癌基因EphB4的转录调控作用及对CEM细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据.方法 采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测EphB4基因甲基化水平,荧光定量PCR法(QPCR)和Western blot方法检测5-aza-CdR处理前后EphB4基因mRNA及蛋白表达水平；MTS法检测不同剂量(1.0、2.5、5.0 μmol/L)的5-aza-CdR作用于CEM细胞0h、24h、48 h、72 h、96h对CEM细胞存活率的影响,流式细胞仪分析5 -aza-CdR作用96h对CEM细胞周期及凋亡的影响.结果 CEM细胞中存在EphB4基因的甲基化,甲基化水平为31.4％；不同浓度5-aza-CdR作用后CEM细胞甲基化水平均下降.5-aza-CdR作用使CEM细胞中EphB4基因的mRNA和蛋白表达上升；5-aza-CdR明显抑制CEM细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关.5-aza-CdR 处理96h后,早期凋亡由4.1％上升为24.8％.用药96 h后,CEM细胞G1期由62.4％降至46.8％,G2期由2.1％升至16.2％,细胞阻滞于G2期.结论 特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使CEM细胞中沉默的EphB4基因重新表达,并可抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡.

作者：李玉华；文飞球；陈亦欣；李长钢；张朝霞；陈小文；李博

来源：中国当代儿科杂志 2012 年 14卷 3期