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目的 探讨人参皂甙对白血病细胞的致凋亡作用及其相关作用机制.方法 采用MTT细胞毒实验检测不同浓度( 100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625 μmol/L)人参皂甙对人白血病-60 (HL-60)细胞的生长抑制活性;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测不同浓度(0、5、10、20 μmol/L)人参皂甙诱导HL-60细胞凋亡情况;提取各种浓度人参皂甙处理的细胞总蛋白,Western blot检测caspase-8、caspase-9和caspase-3裂解情况;Western blot 检测10 μmol/L人参皂甙处理HL-60细胞后caspase-8和caspase-9抑制剂对caspase-3裂解情况的影响.结果 人参皂甙对白血病HL-60细胞具有高效的细胞毒作用,IC50值为7.3±1.2μmol/L;0、5、10、20 μmol/L人参皂甙处理HL-60细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率呈剂量依赖性,各处理组之间差异有统计学意义(F=12.67,P<0.01);Western blot检测细胞中caspase-9和caspase-3出现裂解带,而caspase-8未出现裂解带;10μmol/L人参皂甙诱导caspase-3裂解可以被caspase-9的特异性抑制剂Z-LEHD-FMK所抑制,而caspase-8的特异性抑制剂Z-IETD-FMK却没有这一作用.结论 人参皂甙对人白血病HL-60细胞具有高效的致凋亡作用,激活线粒体凋亡途径可能是其致凋亡的主要作用机制.

作者:刘笑梦;曹姣玲;臧玉柱

来源:中国当代儿科杂志 2012 年 14卷 10期

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作者:
刘笑梦;曹姣玲;臧玉柱
来源:
中国当代儿科杂志 2012 年 14卷 10期
标签:
人参皂甙 细胞凋亡 线粒体通路 人白血病-60细胞
目的 探讨人参皂甙对白血病细胞的致凋亡作用及其相关作用机制.方法 采用MTT细胞毒实验检测不同浓度( 100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625 μmol/L)人参皂甙对人白血病-60 (HL-60)细胞的生长抑制活性;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测不同浓度(0、5、10、20 μmol/L)人参皂甙诱导HL-60细胞凋亡情况;提取各种浓度人参皂甙处理的细胞总蛋白,Western blot检测caspase-8、caspase-9和caspase-3裂解情况;Western blot 检测10 μmol/L人参皂甙处理HL-60细胞后caspase-8和caspase-9抑制剂对caspase-3裂解情况的影响.结果 人参皂甙对白血病HL-60细胞具有高效的细胞毒作用,IC50值为7.3±1.2μmol/L;0、5、10、20 μmol/L人参皂甙处理HL-60细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率呈剂量依赖性,各处理组之间差异有统计学意义(F=12.67,P<0.01);Western blot检测细胞中caspase-9和caspase-3出现裂解带,而caspase-8未出现裂解带;10μmol/L人参皂甙诱导caspase-3裂解可以被caspase-9的特异性抑制剂Z-LEHD-FMK所抑制,而caspase-8的特异性抑制剂Z-IETD-FMK却没有这一作用.结论 人参皂甙对人白血病HL-60细胞具有高效的致凋亡作用,激活线粒体凋亡途径可能是其致凋亡的主要作用机制.