目的 建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的大鼠炎症性肠病(IBD)模型,观察其肠上皮紧密连接蛋白表达以及结肠黏膜通透性的变化.方法 将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组和IBD模型组,每组27只,通过使用3％ DSS持续经饮水途径饲养大鼠6d后恢复正常饮水14 d建立IBD模型,对照组自由饮水.分别干DSS处理后第7天、第14天和第21天观察结肠黏膜病理变化,第21天取结肠组织标本检测髓过氧化物酶活性；采用Ussing chamber检测结肠上皮通透性；通过real-time PCR和Western blot从转录水平和翻译水平分析肠上皮紧密连接蛋白表达.结果 IBD模型组大鼠出现腹泻、便血、体重下降,炎症集中在远端结肠,表现为隐窝脓肿,炎症细胞浸润.与对照组比较,IBD模型组大鼠结肠髓过氧化物酶活性显著增加(P＜0.01),肠上皮跨膜电阻抗值和跨膜电势差显著降低(P＜0.01),短路电流值明显增加(P＜0.01); Real-time PCR和Western blot的结果均提示正常大鼠尚未检测出claudin2的表达,IBD模型组claudin2 mRNA及蛋白表达阳性；IBD模型组occludin、claudin3、ZO-1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于对照组(P＜0.01).结论 IBD大鼠结肠黏膜屏障功能受损,多种紧密蛋白表达改变,其中紧密连接蛋白表达变化可能在慢性修复期IBD屏障受损发病机制中起到重要作用.|
作者：饶艳霞；陈洁；陈蕾蕾；顾伟忠；舒小莉
来源：中国当代儿科杂志 2012 年 14卷 12期
