目的探讨构建柯萨奇病毒B组3型(CVB3)基因疫苗的可行性.方法应用逆转录PCR技术扩增CVB3中国分离株VP1基因,通过TA克隆法构建pCR2.1-CVB3VP1,将CVB3VP1亚克隆至真核表达载体pCEP4,构建真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,并进行酶切和测序鉴定.结果发现CVB3的中国分离株与Nancy株的VP1基因基本一致,均编码293个氨基酸,其中有59处核苷酸存在变异,但仅改变了10处氨基酸编码,证实克隆的片段为CVB3VP1基因,表达载体为pCEP4.结论实验成功地构建了CVB3中国分离株的真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,为CVB3基因疫苗的研究奠定了基础.
作者：田野；钟照华；赵铁强；黄建林；安毅；唐伟；沈景霞；钟学宽；孟繁超；黄永麟；鲁凤民；叶鸿瑁
来源：中国地方病学杂志 1999 年 18卷 3期
