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目的 探讨慢性染砷大鼠肝脏线粒体DNA(mtDNA)及线粒体相关酶,特别是mtDNA编码酶活性的变化.方法 Wistar大鼠经饮水给75 mg/L三氧化二砷6个月.用分光光度法测定肝脏线粒体呼吸酶活性;碱变性法提取大鼠肝脏mtDNA;以PCR大片段扩增法扩增长片段mtDNA;用Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ、Sal Ⅰ、BamH Ⅰ、Msp Ⅰ、MboⅠ、Stu Ⅰ 7种限制性内切酶对扩增片段进行酶切分析.结果 染砷大鼠肝脏线粒体细胞色素C氧化酶(CytC OX)和ATP酶活性下降;而经mtDNA扩增片段凝胶电泳分析和7种限制性内切酶酶切分析,未发现染砷大鼠肝脏参与编码上述2种线粒体酶的4151 bp片段有碱基缺失、重复和突变等异常表现.结论 慢性染砷能够导致肝细胞mtDNA参与编码的CytC OX和ATP酶活性下降,进一步证实了染砷对肝细胞及其线粒体的损害作用.但其活性下降的机制,目前尚不能以砷致mtDNA片段的变化来解释,需进一步进行DNA序列分析研究.

作者:齐晓岚;钟复光

来源:中国地方病学杂志 2007 年 26卷 4期

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作者:
齐晓岚;钟复光
来源:
中国地方病学杂志 2007 年 26卷 4期
标签:
砷 线粒体,肝 DNA,线粒体 呼吸酶
目的 探讨慢性染砷大鼠肝脏线粒体DNA(mtDNA)及线粒体相关酶,特别是mtDNA编码酶活性的变化.方法 Wistar大鼠经饮水给75 mg/L三氧化二砷6个月.用分光光度法测定肝脏线粒体呼吸酶活性;碱变性法提取大鼠肝脏mtDNA;以PCR大片段扩增法扩增长片段mtDNA;用Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ、Sal Ⅰ、BamH Ⅰ、Msp Ⅰ、MboⅠ、Stu Ⅰ 7种限制性内切酶对扩增片段进行酶切分析.结果 染砷大鼠肝脏线粒体细胞色素C氧化酶(CytC OX)和ATP酶活性下降;而经mtDNA扩增片段凝胶电泳分析和7种限制性内切酶酶切分析,未发现染砷大鼠肝脏参与编码上述2种线粒体酶的4151 bp片段有碱基缺失、重复和突变等异常表现.结论 慢性染砷能够导致肝细胞mtDNA参与编码的CytC OX和ATP酶活性下降,进一步证实了染砷对肝细胞及其线粒体的损害作用.但其活性下降的机制,目前尚不能以砷致mtDNA片段的变化来解释,需进一步进行DNA序列分析研究.