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目的 观察细胞外调节蛋白激酶(Erk)1/2、磷酸化(phospho)-Erk1/2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在实验性慢性氟中毒大鼠脑组织中的改变及硫酸软骨素的治疗作用与机制.方法 采用成组设计及细胞培养方法,将人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组(正常培养液)、染氟组(氟离子:4.0 mool/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:4.0 mmol/L、硫酸软骨素:0.4 g/L).染氟24h,电子显微镜观察SH-SY5Y细胞超微结构变化;染氟72 h,锥虫蓝染色观察细胞存活数量并计算细胞存活率.15只清洁级SD大鼠,按体质量(100~120 g)采用随机数字表法分为对照组(饮用自来水,含氟量<0.5 mg/L)、染氟组(氟离子:10.0 mg/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:10.0 mg/L,染氟90 d后0.66 mg/kg硫酸软骨素连续腹腔注射5 d),每组5只,实验周期为95 d.采用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化,蛋白质免疫印迹法检测脑组织中Erk1/2、phospho-Erk 1/2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平,免疫组织化学法检测大鼠脑组织海马CA2区phospho-Erk 1/2、MMP-2、MMP-9的表达及分布.结果 细胞体外培养结果显示,电镜下硫酸软骨素处理组细胞内吞饮小泡较多,有线粒体及内质网肿胀但相对染氟组较少.硫酸软骨素处理组SH-SY5Y细胞存活率[(92±23)%]和细胞数[(7.83±1.38)×106个/ml]明

作者:王胜远;邱志伟;官志忠;刘艳洁

来源:中华地方病学杂志 2018 年 37卷 4期

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王胜远;邱志伟;官志忠;刘艳洁
来源:
中华地方病学杂志 2018 年 37卷 4期
标签:
氟 硫酸软骨素 细胞外调节蛋白激酶1/2 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 Fluorine Chondroitin sulfate Erk1/2 MMP-2 MMP-9
目的 观察细胞外调节蛋白激酶(Erk)1/2、磷酸化(phospho)-Erk1/2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在实验性慢性氟中毒大鼠脑组织中的改变及硫酸软骨素的治疗作用与机制.方法 采用成组设计及细胞培养方法,将人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组(正常培养液)、染氟组(氟离子:4.0 mool/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:4.0 mmol/L、硫酸软骨素:0.4 g/L).染氟24h,电子显微镜观察SH-SY5Y细胞超微结构变化;染氟72 h,锥虫蓝染色观察细胞存活数量并计算细胞存活率.15只清洁级SD大鼠,按体质量(100~120 g)采用随机数字表法分为对照组(饮用自来水,含氟量<0.5 mg/L)、染氟组(氟离子:10.0 mg/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:10.0 mg/L,染氟90 d后0.66 mg/kg硫酸软骨素连续腹腔注射5 d),每组5只,实验周期为95 d.采用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化,蛋白质免疫印迹法检测脑组织中Erk1/2、phospho-Erk 1/2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平,免疫组织化学法检测大鼠脑组织海马CA2区phospho-Erk 1/2、MMP-2、MMP-9的表达及分布.结果 细胞体外培养结果显示,电镜下硫酸软骨素处理组细胞内吞饮小泡较多,有线粒体及内质网肿胀但相对染氟组较少.硫酸软骨素处理组SH-SY5Y细胞存活率[(92±23)%]和细胞数[(7.83±1.38)×106个/ml]明