目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸(L-iminoethyl ornithine hydrochloride,L-NIO)对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以及一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性改变的影响.方法 将体外培养的SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、L-NIO组、低氟+L-NIO组、高氟+ L-NIO组,n=3.对照组加入与实验组等体积的培养液,低氟组和高氟组加入氟化钠(sodium fluoride,NaF)浓度分别为0.2、2.0 mmol/L,L-NIO组加入3μmol/L L-NIO,低氟+L-NIO组和高氟+L-NIO组分别加入0.2 mmol/L NaF和3μmol/L L-NIO、2.0 mmol/L NaF和3μmol/L L-NIO,培养时间为48 h.采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞中eNOS蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR)法检测细胞中eNOS mRNA表达水平,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,硝酸还原酶法和比色法检测细胞培养液中NO含量和NOS活性.结果 与对照组(1.000±0.026)比较,低、高氟组eNOS蛋白表达量(1.108±0.071、1.349±0.057)升高,L-NIO组(0.755±0.148)下降(P均<0.05);与低氟组比较,高氟组升高,低氟+ L-NIO组(0.
作者:朱丹;刘宇平;桂传枝;官志忠
来源:中华地方病学杂志 2018 年 37卷 6期