目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)对小鼠血管平滑肌细胞的损伤作用及表型转变的影响.方法 制备CSE,分别使用2.5%、5%、10%、20% CSE处理小鼠血管平滑肌细胞(MOVAS细胞),并以正常MOVAS细胞作为对照组.MTT法检测各浓度CSE处理后细胞的存活率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS水平.流式细胞仪结合PI单染以及Annexin V-PI双染技术分别分析10% CSE处理后细胞周期和细胞凋亡率的变化.实时荧光定量PCR分析10% CSE处理后MOVAS细胞内SMemb和SMA的mRNA表达水平,Western blot检测10% CSE处理后MOVAS细胞内SMemb和SMA的蛋白表达水平.结果 2.5%、5%、10%及20% CSE处理后,MOVAS细胞的存活率分别为89.6%±8.6%、65.2%±10.0%、53.6%±6.9%、43.1%±5.9%,各组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度CSE处理后细胞内ROS水平显著提高.10% CSE处理后细胞G1期比例明显上升,细胞凋亡率也显著提高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).10% CSE处理后MOVAS合成型标志物SMemb的表达水平显著增高,而收缩型标志物SMA的表达水平显著降低.结论 CSE可以对小鼠血管平滑肌细胞造成损伤,并能够使小鼠血管平滑肌细胞表型由收缩型向合成型转变,其机制可能与CSE引起的细胞内ROS增高有关.
作者:宁静;张松;张余杭
来源:中国动脉硬化杂志 2015 年 23卷 1期