目的 应用双向电泳和质谱技术研究丹参酮Ⅱ A对ox-LDL诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞蛋白质组的影响,探讨丹参酮Ⅱ A调脂和抗动脉粥样硬化作用的分子机制.方法 分离纯化获得人血清低密度脂蛋白(LDL),用CuSO4进行氧化得到ox-LDL,与RAW264.7细胞共孵育,形成的泡沫细胞用含20 mg/L丹参酮Ⅱ A继续培养24h作为丹参酮组,不合丹参酮Ⅱ A的溶液培养24h作为对照组,经超声破碎细胞,离心,取上清进行蛋白质定量,丹参酮Ⅱ A组和对照组蛋白质等量上样,进行双向电泳,电泳完毕后用硝酸银染色得到不同样品的蛋白质组图谱.经Labscan软件进行差异蛋白质组分析,选取蛋白质表达量差异超过2倍的蛋白质作为差异蛋白.经胶内酶解及质谱分析,得到肽质量指纹图谱,通过Mascot数据库搜索,结合2-D图谱上蛋白质的分子量、等电点信息鉴定蛋白质.结果 丹参酮组钙网蛋白、波形蛋白、过氧化物酶2、CuZn-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、亮氨酸拉链蛋白、stabilin-1、造血细胞系特异性蛋白表达量增加,而GTP蛋白、ATP合酶、mimitin、IL-5、热休克蛋白70(HSP70)、翻译控制肿瘤蛋白、氯离子通道蛋白1表达量降低.结论 丹参酮Ⅱ A通过降低GTP蛋白和HSP70表达以及提高钙网蛋白表达改善泡沫细胞对脂代谢的调控功能;通过提高stabilin-1表达和降低A
作者：闫昭芫；耿伸；刘佳；卢德赵；柴惠
来源：中国动脉硬化杂志 2016 年 24卷 4期
