目的 通过细胞实验探究早发冠心病(PCHD)患者高密度脂蛋白(HDLPCHD)与健康人群HDL(HDLhealth)抗人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡作用是否有区别及其可能机制.方法 采集PCHD患者和与之相匹配的健康人血样,并提取HDL;不同浓度氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理HUVEC24h,MTT检测细胞存活率,明确ox-LDL引起HUVEC凋亡的合适浓度;不同浓度、不同时间的HDLhealth预处理HUVEC后,再用合适浓度的ox-LDL处理HUVEC24h,MTT检测细胞存活率,明确HDLhealth预处理HUVEC的最适浓度与最适作用时间;用最适浓度HDLhealth 、HDLPCHD对HUVEC进行最适作用时间的预处理,再用合适浓度的ox-LDL处理HUVEC 24h,MTT检测细胞存活率.Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒进行流式细胞检测,Westem blot检测Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达,用试剂盒测定活性氧(ROS)活性,使用Lipoprint脂蛋白分析仪分析HDLhealth和HDLPCHD亚组分(HDL1-HDL10)分布情况.结果 100 mg/L ox-LDL处理HUVEC24h后细胞存活率为60.34%,较空白处理组明显降低(P<0.05);200 mg/L HDLhealth预处理HUVEC 18 h后,细胞存活率为82.01%,可以明显减弱ox-LDL对细胞的损伤;200 mg/LHDLhealth显著抑制100 mg/L ox-LDL诱导的HUVEC凋亡及Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达和ROS产生;200 mg/LHD
作者:侯曜曜;尔璐;张永亮;宋晓苏;白瑞;梁斌;边云飞;肖传实
来源:中国动脉硬化杂志 2017 年 25卷 7期