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目的 探讨琥珀酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响及其调控机制.方法 用琥珀酸类似物琥珀酸二乙酯(DS)处理HUVEC 24 h,比色法检测细胞内琥珀酸含量,Western blot检测细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素DN端(GSDMD-N)的含量;ATP测定试剂盒以及活性氧(ROS)荧光探针分别检测琥珀酸对HUVEC的ATP以及ROS生成的影响.ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)检测ROS在琥珀酸诱导HUVEC焦亡中的作用.琥珀酸氧化抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)检测琥珀酸氧化代谢对ROS产生的影响.结果 DS促HUVEC内琥珀酸蓄积,上调焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N和NLRP3的表达,抑制ATP生成并上调ROS产生.NAC抑制琥珀酸诱导的ROS生成,并下调上述焦亡相关蛋白的表达.DMM下调琥珀酸诱导的ROS产生以及HUVEC的焦亡.结论 琥珀酸通过氧化代谢上调ROS生成,进而促进HUVEC焦亡.

作者:章舒蕾;梁亚敏;罗涔方;危当恒

来源:中国动脉硬化杂志 2021 年 29卷 1期

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作者:
章舒蕾;梁亚敏;罗涔方;危当恒
来源:
中国动脉硬化杂志 2021 年 29卷 1期
标签:
琥珀酸 人脐静脉内皮细胞 线粒体 活性氧 焦亡 动脉粥样硬化
目的 探讨琥珀酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响及其调控机制.方法 用琥珀酸类似物琥珀酸二乙酯(DS)处理HUVEC 24 h,比色法检测细胞内琥珀酸含量,Western blot检测细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素DN端(GSDMD-N)的含量;ATP测定试剂盒以及活性氧(ROS)荧光探针分别检测琥珀酸对HUVEC的ATP以及ROS生成的影响.ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)检测ROS在琥珀酸诱导HUVEC焦亡中的作用.琥珀酸氧化抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)检测琥珀酸氧化代谢对ROS产生的影响.结果 DS促HUVEC内琥珀酸蓄积,上调焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N和NLRP3的表达,抑制ATP生成并上调ROS产生.NAC抑制琥珀酸诱导的ROS生成,并下调上述焦亡相关蛋白的表达.DMM下调琥珀酸诱导的ROS产生以及HUVEC的焦亡.结论 琥珀酸通过氧化代谢上调ROS生成,进而促进HUVEC焦亡.