背景与目的 BIM基因编码的蛋白属于BCL2蛋白家族的成员，作为凋亡调控因子参与多种细胞活动。BIM基因上2,903bp的插入缺失片段与非小细胞肺癌EGFR-TKI靶向用药的获得性耐药相关。建立并优化HRM方法有助于快速、准确地检测BIM基因2,903 bp片段的缺失，为临床工作提供指导性的意见。本研究建立与稳定了HRM的检测方法，并在30例肺癌样本以及30例正常对照样本中检测BIM基因缺失情况。方法设计、合成针对BIM基因片段缺失的引物，优化高分辨率熔解曲线（high resolution melting, HRM）分析方法。并选取部分样本通过普通PCR方法和直接测序法检测BIM基因缺失情况。野生型模板扩增产物其解链温度要高于缺失型产物的解链温度。野生型和缺失型产物的熔解曲线可见明显差异，相应的Tm值相差约2.5 oC。结果经过HRM基因突变分析方法，在30例肺癌样本中检测到1例为BIM基因纯合缺失型，7例为杂合缺失型，22例为野生型。在30例正常对照样本中检测，2例为杂合缺失型，28例为野生型。结论本研究建立的对BIM基因片段缺失的高分辨率熔解曲线法是一种，灵敏、准确、快速、高通量的方法。
作者：夏金晶；白浩；熊丽纹；李蓉；颜波；邵敏华；韩宝惠
来源：中国肺癌杂志 2014 年 3期
