背景与目的已有的研究提示肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6)在肺癌中常常扩增,可能扮演癌基因角色,但TRAF6的确切作用尚未充分阐明。本研究探索TRAF6表达对肺癌细胞株的增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力的影响以及可能作用机制。方法选用A549、H1650、SPC-A-1以及Calu-3等四种肺癌细胞株,应用蛋白印迹、qRT-PCR检测其TARF6蛋白及mRNA表达。SPC-A-1、Calu-3细胞转染TRAF6 siRNA,以EMSA方法检测不同处理组核因子-κB的DNA结合活性, MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡,流式细胞仪进行细胞周期测定,划痕实验及Tran-swell小室法检测细胞迁移及侵袭能力,并应用蛋白印迹检测泛素化抗体、p65、CD24、CXCR4等蛋白表达。SPC-A-1细胞提取DNA后,应用二代测序法进行全基因组测序。结果在四种细胞株中,SPC-A-1和Calu-3细胞TRAF6相对高表达,TRAF6发生自身K63-泛素化,但仅在SPC-A-1细胞中观察到核因子-κB组成性活化。转染TRAF6 siRNA后,SPC-A-1、Calu-3细胞TRAF6表达明显下调,与空白组及对照组相比,下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞核因子-κB活性、降低迁移及侵袭能力以及促进细胞凋亡,CD24和CXCR4的表达也明显下调,但对
作者:林根;黄传钟;苏光建;胡卉华;徐海鹏;黄诚
来源:中国肺癌杂志 2015 年 11期